2025年1月24日，EON体育4平台/張江高等研究院合成科學創新研究中心倪俊副教授課題組在Cell上發表題為“Rational multienzyme architecture design with iMARS”的論文◀️，揭示多酶空間鄰近性和效率的“密碼”，解決了50多年以來多酶組裝無標準的難題，實現人工多酶復合體序列到功能的理性設計。

生物催化在細胞代謝和生物製造中扮演著至關重要的角色🫘👨🏿‍⚕️，多酶級聯催化被廣泛應用於醫藥、食品和工業等領域🤞🏻🌼。自然界中🌸，多酶復合體的空間結構通常被精細調控以控製催化反應速率🔨🤹🏼。受自然啟發🌎，研究人員通過融合酶、蛋白支架和核酸支架等多種組裝策略來構建人工多酶復合體，從而提高級聯反應的催化效率🧝🏼‍♂️🧏。然而，人工多酶復合體的空間構效關系困擾學界50多年，人工多酶組裝只能依賴於實驗試錯🐓，還沒有相應的理性設計工具👩🏻‍🎓，限製了其應用🎑。

為了應對上述挑戰，研究團隊通過高通量測試及空間結構預測解析了人工多酶復合體的空間構效關系🙎🏿‍♀️，初步破譯了多酶空間鄰近性和效率的“密碼”，發現融合酶的空間距離和通道角度是影響催化效率的關鍵因素。基於此📯，研究團隊開發了人工多酶復合體理性設計工具iMARS，內置包含上千種不同性質linker的數據庫，通過ParaFold進行高通量蛋白質結構預測，並基於分子對接和CAVER等工具進行計算和DO Score打分篩選，實現從氨基酸序列到人工多酶復合體相對活性的快速預測。

研究團隊在白藜蘆醇、香蘭素和麥角硫因等化合物的生物合成以及PET塑料的生物降解中探究了iMARS方法在不同應用場景中的設計能力〽️。其中，設計的最佳融合酶相較遊離酶使得工程大腸桿菌白藜蘆醇的產量提升了45.1倍，並在釀酒酵母和光合微生物藍藻中也進行應用，表明iMARS作為分子水平的設計工具可廣泛適用於不同宿主細胞🏊🏿‍♀️🛐。在PET塑料的體外生物降解實驗中🕵🏻‍♂️，掃描電子顯微鏡（SEM）觀察到設計的融合酶對PET薄膜的降解侵蝕痕跡更加顯著。在麥角硫因合成的分批補料發酵過程中，包含優化設計融合酶的工程菌株的生產效率達到最高水平🔍🥩，展現了iMARS在生物製造工業化中的潛力。目前💆🏽，iMARS可在線使用（http://www.imars-lumybio.com/）🧏🏽‍♂️，為研究人員快速設計多酶復合體提供了便利。

這項研究基於多種深度學習軟件開發，體現了人工智能對於生物學的推動作用。對於多酶復合體“創造🕵🏻‍♀️💅🏿、學習和設計”的過程也體現了合成生物學“造物致知、造物致用”的理念。該研究開發的iMARS工具是首個人工多酶復合體的理性設計工具，標誌著多酶組裝從依賴實驗試錯法邁向理性設計的新紀元，將推動合成生物學和生物製造的快速發展▫️，對醫藥、食品和工業等領域具有重要意義🙇🏼‍♂️。

EON体育4平台➜🤕、微生物代謝全國重點實驗室、張江高等研究院合成科學創新研究中心倪俊副教授為論文通訊作者，EON体育4博士生王嘉偉為該論文第一作者👐🏽，EON体育4為第一單位。EON体育4教授趙一雷和上海光玥生物科技有限公司孟詩雨為本研究提供了重要支持。本論文研究獲得了國家自然科學基金、科技部國家重點研發計劃和光玥生物的支持👨‍🌾。

論文鏈接🏸🐁：

https://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(24)01471-5